美宝国际集团细胞器官功能研究室
实验目的：通过细胞实验对美宝再生物质进行筛选，筛选出具有促进正常肺细胞生长同时又能杀灭肺癌细胞功效的在生物质。
实验品： 6种再生物质实验品：PRC11, PRC21,PRC31，PRC12, PRC22,PRC32。
实验细胞：人肺癌细胞A549，人正常胚胎肺细胞MRC5
实验方法：
1、将再生物质实验品按5%浓度加至培养基中，放37℃缓释48小时；
2、细胞培养：A549和MRC5 培养到一定数量分六组传代，传代后生长良好的细胞加入缓释后的培养基；
3、加入培养基后开始计时，在24小时、48小时、72小时、5天几个时间段观察细胞的形态及生长状况，并做拍照纪录
小结：
1．正常情况下，A549细胞可无限传代，MRC5细胞可有限传代至P35-P50，本实验选择P25细胞。
2．通过实验观察得知: 5%实验品PRC21严重影响A549和MRC5细胞状态，5%实验品PRC21、PRC31实验到第三天时A549 细胞死亡,MRC5存活至第5天也死亡，这3个实验品对A549和MRC5的作用效果区别不明显；
3．5%浓度的实验品PRC12对A549和MRC5细胞都没有致死和阻止生长作用,但细胞内颗粒浓密；5%实验品PRC22、PRC32能够致A549细胞死亡，MRC5细胞继续存活；
4．按照同样方法A549重复实验8次，所得实验结果与报告一致；MRC5重复实验9次，2次实验结果与报告一致，分析原因：① 细胞经冻存复苏后活力下降； ② 培养基批次不同引起营养成分细微变化导致细胞状况不佳；③ 细胞对消化时间和强度非常敏感，要求苛刻，消化时容易造成细胞状况变差；
5．筛选实验会受到很多细微的不可控因素的影响，实验需要反复重复并严格控制细胞培养中的各个环节，才能确保实验结果的准确和可靠，实验过程中曾采用过不同方法进行筛选，没有得到相同结果；
6．本实验选择PRC12，PCR22，PRC32对A549和MRC5的实验观察图片做结果说明。
1) PRC12对A549的实验观察图片:
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| 加入再生物PRC12，28小时A549细胞形态不变，核周有散在颗粒 |
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| 加入再生物PRC12，48小时A549细胞保持形态，有增殖,核周有颗粒 |
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| 加入再生物PRC12，72小时A549细胞保持形态，核周颗粒密集 |
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| 加入再生物PRC12，5天A549细胞保持形态，核周颗粒密集，有增殖 |
2) PRC22 A549的实验观察图片:
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| 加入再生物PRC22，28小时A549细胞开始萎缩，核周黑颗粒较浓 |
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| 加入再生物PRC22，48小时A549细胞形态萎缩，稀少,核周颗粒见浓 |
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| 加入再生物PRC22，72小时A549细胞已萎缩,开始死亡 |
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| 加入再生物PRC22，5天A549细胞死亡漂浮 |
3) PRC32对A549的实验观察图片:
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| 加入再生物PRC32，28小时A549细胞开始萎缩，核周黑颗粒较浓 |
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| 加入再生物PRC32，48小时A549细胞形态萎缩，稀少,核周颗粒见浓 |
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| 加入再生物PRC32，72小时A549细胞已萎缩,开始死亡 |
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| 加入再生物PRC32，5天A549细胞死亡漂浮 |
4) PRC12对MRC5的实验观察图片：
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| 加入再生物PRC12，24小时MRC5细胞形态整齐、完整、饱满,状态良好 |
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| 加入再生物PRC12，48小时MRC5细胞形态饱满,有增殖 |
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| 加入再生物PRC12，72小时MRC5细胞有增殖,形态好,但有颗粒 |
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| 加入再生物PRC12，5天MRC5细胞100%汇合,核周有些颗粒 |
5) PRC22对MRC5的实验观察图片:
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| 加入再生物PRC22，24小时MRC5细胞形态整齐、完整、饱满,状态良好 |
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| 加入再生物PRC22，48小时MRC5细胞形态饱满,有增殖 |
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| 加入再生物PRC22，72小时MRC5细胞有增殖,形态饱满,颗粒较少 |
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| 加入再生物PRC22，5天MRC5细胞100%汇合 |
7）对照细胞
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| MRC5对照细胞图片 |
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| A549对照细胞图片 |
6) PRC32对MRC5的实验观察图片:
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| 加入再生物PRC32，24小时MRC5细胞形态整齐、完整、饱满,状态良好 |
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| 加入再生物PRC32，48小时MRC5细胞形态饱满,有增殖 |
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| 加入再生物PRC32，72小时MRC5细胞有增殖,形态好,但有颗粒 |
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| 加入再生物PRC32，5天MRC5细胞100%汇合。 |
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