细胞诱导癌细胞产生的试验转变结果


  按常规的细胞诱导癌细胞系实验方法,加入适量的再生物质后,没有产生诱导后的细胞。详细研究资料陆续发表。
  注:下面仅报告钴60照射对大白鼠骨髓的影响研究
  再生物质预防60钴(60Co)辐射引起的骨髓细胞增生障碍之实验研究 摘要
  
目的:观察体内再生物质对小白鼠骨髓细胞的促增殖作用。
  方法
:昆明种小白鼠,分实验组和对照组,实验组持续喂饲含再生物质的饲料,对照组持续喂饲普通饲料。实验第一天进行第一次60钴照射,一定时间后,再进行一次60钴照射,再经过一定时间,观察两组骨髓细胞的变化。
  结果
:经过42天的实验,发现实验组小白鼠骨髓细胞明显多于对照组。
  结论
:本剂量下,在生物质能预防60Co辐射引起的骨髓细胞增生障碍。
  关键词  骨髓细胞;再生物质;60钴
  骨髓内有大量增生活跃的细胞,这些细胞对射线敏感。基于这一原理,本实验观察再生物质对射线损伤骨髓后的再造作用,为再生物质未来开发提供决策咨询。

一. 材料与方法
昆明种雌性小白鼠(医科院动物所,清洁级,下同)24只,随机分为实验组和对照组,各12只,体重分别为:
实验组:28;28;30;32;28;31;31;28;31;33;30;31g。 =30.08±1.73
对照组:26;28;31;24;28;28;31;24;27;28;28;28g。 =27.58±2.19
从2003年9月22日进行第一次钴60照射,剂量3.5Gy,同时实验组的小白鼠改换喂饲含10%再生物质的全价饲料(医科院动物所),而对照组小白鼠仍喂饲普通全价饲料(医科院动物所),两个组饮用水均为自来水,动物饲养条件固定为:昼夜节律为12h/12h,室温20~22℃,相对湿度40%~60%,每天更换饮水。10月17日进行第二次钴60照射,剂量4.5Gy。11月2日 结束实验,整个实验过程共42天,测定每只小鼠的体重,并收获每只小鼠双侧股骨骨髓腔的全部骨髓细胞进行HE染色,染色过程为:(1)将每个小白鼠用CO2安乐处死,酒精消毒,切开皮肤和肌肉,取两条股骨,将股骨表面的肌肉剔除干净,并用无菌PBS冲洗干净,然后用无菌PBS将双侧股骨骨髓腔内的所有骨髓细胞冲出,得到细胞悬液,1500rpm/min,离心5min,吸弃绝大部分上清液,留约10ul;(2)混悬细胞,制成细胞悬液;(3)将上述制备好的微量细胞悬液,加至载玻片上,用希耳球吹匀平摊;(4)干燥至无水分为止;(5)染色过程:10%甲醛固定10分钟,水洗;苏木精染色2分钟,水洗30秒;1%盐酸酒精分化20秒,自来水洗20秒;稀氨水30秒,自来水洗20秒;伊红染色1分钟,水洗10秒;85%酒精20秒;90%酒精30秒;95%酒精1分钟;无水乙醇Ⅰ1分钟;无水乙醇Ⅱ2分钟;二甲苯Ⅰ1分钟;二甲苯Ⅱ1分钟;中性树胶盖玻片封固;37℃烤干。每只小鼠的骨髓细胞做一个涂片染色,24只小白鼠得到24个实验结果,结果照相记录保存。

二.实验结果

(一)实验结束时体重测定结果为:
实验组:35.29;32.97;41.51;31.43;38.89;34.68;35.65;38.21;38.69;33.70;44.02;33.07g, =36.51±3.79
对照组:26.78;27.73;32.49;29.26;37.74;35.69;40.47;36.14;36.71;31.75;30.75;33.09g。 =33.22±4.22
实验组和对照组二者无差异。说明GIC并未明显影响小白鼠的整个机体代谢。
(二)HE染色结果
将所得到的24只小白鼠的24个骨髓细胞HE染色结果进行照相,其中包括实验组12个,对照组12个。涂片着色区的颜色深浅和浓密程度代表每只小白鼠骨髓细胞的多少,以下为12个实验组样本和12个对照组样本的细胞涂片照片。对所得结果进行简单分析可知,实验组细胞明显比对照组细胞多,说明再生物质对骨髓细胞再生是有确切作用的。

1.以下为实验组图片:(均为HE染色,×4)
2.以下为对照组图片:(均为HE染色,×4)