胃癌细胞与正常骨髓细胞共同培养的转变试验结果


(一)方法与材料BGC-823细胞与高浓度骨髓细胞之共培养
1.BGC-823细胞的预培养:对数生长期的细胞,用1:1的0.25%胰蛋白酶 和0.02%EDTA混合液进行消化回收,用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液将细胞稀释成适当浓度,备一预先用鼠尾胶原包被的12孔培养板,每孔加上述细胞悬液80μl,补加含10%胎牛血清的RPMI1640培养液1ml,培养后第一天,距离培养时间21小时,此时所有细胞均已经贴壁,但细胞密度很低,加入按下述方法制备的小白鼠骨髓细胞悬液。
2.小白鼠骨髓细胞与BGC-823细胞的共培养:昆明种22天龄雄性小白鼠(购自中国医学科学院实验动物研究所,清洁级),用上述相同方法得到小白鼠骨髓细胞悬液13ml,将这些小白鼠骨髓细胞悬液均分至上述的已经培养了BGC-823细胞的培养板的12个孔中。24小时后,于培养板的A1、A2、A3和A4四个孔中加入3小块再生物质,而对照组的其余8个孔即B1、B2、B3、B4|、C1、C2、C3和C4加等量含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,培养其间根据需要换液。
(二) BGC-823细胞共培养结果

 (×100)

图5   共培养后第1天。图中可见BGC-823细胞和骨髓细胞共同生长。大细胞为BGC-823细胞,小细胞为骨髓细胞。


6A(×200)  6B(×400)

图6  共培养后第5天,用药后第4天。6A为实验组,6B为对照组。6A中为大量生长的骨髓细胞,其中的BGC-823细胞(较大的细胞)已经不再贴壁生长,表明细胞生长严重不良甚或死亡,图中可见大量的骨髓细胞,包括大量单个细胞和克隆。6B中以BGC-823细胞为主,骨髓细胞已经很少。


7A(×200) 7B(×200)

图7 共培养后第7天,用药后第6天。7A为实验组,7B为对照组。实验组中骨髓细胞增加,BGC-823细胞更少,对照组中几乎均为BGC-823细胞。


8A(×200)  8B(×400)

图8 共培养后第11天,用药后第10天。8A为实验组,8B为对照组。实验组中骨髓细胞增加,克隆也较多,BGC-823细胞更少,对照组中均为BGC-823细胞,且生长更为明显。