• MEBO抗感染作用实验研究(续)
  • 山东省滨州医学院(256603) 曲云英 邱世翠 王运平 李波清 傅志强

    [摘要] 目的:观察MEBO(含100% MEBO,以下简称MEBO)对烧伤感染常见细菌如 变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌的作用。方法:将上述细 菌接种在普通琼脂培养基上,并在接种的细菌表面涂一层MEBO,置37℃,20h~22h观察 。结果:MEBO使上述细菌的形态结构发生变异。与在含25%MEBO和含50%MEBO 的培养基上细菌形态变异现象相比较,无论在细菌形态变异出现的时间和形态变异的特点都有明显统计学差异。结论:MEBO具有较强的抗感染作用。

    [关键词] MEBO 细菌 形态变异 血浆凝固酶

    Experimental Research on Anti-infection Effect of MEBOQu Yunyi ng, Qiu Shicui, Wang Yunping, et al. Binzhou Medical College, Binzhou, Shandong Province 256603

    [Abstract] Objective:To observe the effect of 100%MEBO (MEBO) on com mon bacteria such as proteus, escherichia coli, ps.aeruginosa and staphylococcus aureus. Met hods: The above stated bacteria were cultured in agar medium and then a layer of MEBO was applied on the bacteria. After incubated for 20 to 22 hr, the bacteria were examined. Results: MEBO could induce morphological and structural variatio n of the bacteria. Compared with the results of the same bacteria cultured on 25 % MEBO and 50% MEBO media, the difference in appearing time of variation and var iation characteristics was significant. Conclusion: MEBO has relatively strong a nti-infection effect.

    [Key words] MEBO Bacteria Bacterial variation

    我们曾报道过实验观察变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌在含有25% MEBO和 50%MEBO 培养基上发生形态结构等特性的变异现象[1]。本实验是模拟临床烧伤病 人创面涂抹一定厚度MEBO的用药方法而设计的。实验观察了MEBO使上述细菌发生形态变异的 现象,比在含25%MEBO和含50%MEBO培养基上的形态变异现象出现的早,形态变异特点也有差 别,进一步验证了MEBO的抗感染作用。

    一、资料和方法

    (一) 材料

    MEBO系北京光明中医烧伤创疡研究所研制。菌种为大肠杆菌、变形杆菌和金黄色葡萄球菌( 由本室提供)、绿脓杆菌(由滨医附院检验科提供)。营养琼脂由北京市海淀区微生物培养基 制品厂提供。

    (二) 实验方法

    制备普通琼脂培养基。将上述4种细菌分别密集划线接种于普通琼脂培养基上。接种细菌的 面积约5×3cm。再将MEBO放置于培养基中未接种细菌的部位,分别用无菌取菌环取MEBO以 密集划线法涂布于已接种细菌的表面。然后,将培养基置37℃温箱。20h~22h为一代进行传 代,传10~15代。每代细菌都在涂抹MEBO的细菌处2~3个不同部位取菌涂片、染色,观察形 态变化。做金葡菌血浆凝固酶试验,观察绿脓杆菌色素变化。

    二、检测指标

    1.观察MEBO对变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌等的形态结构等的影响。

    2.对上述4种细菌在MEBO和在含25%MEBO、50%MEBO的培养基上细菌形态结构、变异特点进 行比较。

    三、结果

    (一) MEBO对4种细菌形态变异的影响

    1.MEBO对变形杆菌形态变异的影响(见表1)。

    表1 MEBO对变形杆菌形态变异的影响

    2.MEBO对大肠杆菌形态变异的影响(见表2)

    表2 MEBO对大肠杆菌形态变异的影响

    3.MEBO对绿脓杆菌形态变异的影响(见表3)

    表3 MEBO对绿脓杆菌形态变异的影响

    4.MEBO对金黄色葡萄球菌血浆凝固酶的影响(见表4)

    表4 MEBO对金黄色葡萄球菌血浆凝固酶的影响

    5.变形杆菌形态变异特点比较(见表5)

    表5 变形杆菌形态变异特点比较

     

    四、讨论

    本实验模拟烧伤病人临床使用MEBO的用药方式,对涂抹有MEBO的上述四种细菌培养在37℃, 20h~22h后进行观察比较。实验结果表明MEBO对上述四种细菌在导致形态变异,使绿脓杆菌 色素消失,和金葡菌血浆凝固酶产生能力减弱等方面都比25%MEBO和50%MEBO的作用显著,而 且出现的早,形态变异的特点也有差异。实验结果与以前报道的不同浓度的MEBO的抗菌作用 相一致[1],认为MEBO的药效是在同MEBT配合下所产生的[2]。

    从表1~4中还可以看出,将每种细菌具有共同形态变异特点的归为一组,这是较粗的分组, 因为细菌在MEBO的作用下,传代的代数不同,以及同一代的细菌接触MEBO量的多少不同,在 形态变异方面是有差别的。上述细菌发生形态结构的变异现象,说明了细菌的代谢和生理等 特性的改变与它所处的环境有密切关系。

    多种细菌均能在没有基因改变的情况下发生形态结构等方面的变异。这种非遗传性变异到目 前为止除对诱导酶所引起的变异了解得比较深入外,其他变异现象的发生机制尚不十分清楚 。但有充分证据说明分裂是受复制的控制[3]。以上现象也说明:细胞分裂对MEBO 药物非致死因子作用的敏感性比蛋白质、DNA、RNA合成,膜的形成更敏感,导致形成长杆菌 和多核丝状细胞[4]。这种非遗传性变异在适宜条件下经过一段时间可以恢复。但 上述杆菌在MEBO的作用下连续传代,最后形成比原代菌小的杆菌或近似圆球形的细菌,多数 细菌菌体可见到着色深的颗粒。说明细菌在MEBO环境中最终导致了细菌的代谢合成速度减慢 ,影响了细菌生长繁殖速度。又如金葡菌血浆凝固酶产生明显减弱,这些都能影响细菌的毒 性作用。

    实验结果进一步说明了原剂型MEBO比含25%MEBO和含50%MEBO的抗感染作用都强。至于上述细 菌变异现象的产生机制仍尚须深入探讨研究。

    参 考 文 献

    [1] 曲云英等MEBO抗感染机理实验研究中国烧伤创疡杂志,1996,(1);19

    [2] 徐荣祥烧伤湿性医疗技术中国烧伤创疡杂志,1997,(3):4

    [3] J.B.G克瓦平斯基主编赵太键等译分子生物学科学出版社,1986,375

    [4] 陈世和等编著微生物生理学原理同济大学出版社,1992,265