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〔摘　要〕　目的：以MEBO治疗深Ⅱ度烧伤观察创面愈合前后Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型胶原变化。探讨MEBO与烧伤疤痕间关系。方法：设治疗组与传统干性治疗组各15例并切取治疗前后活体组织用免疫组化SP染色法观察治疗前后胶原Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型变化。结果：MEBO治疗组Ⅰ型含量(＋)—(++)12／15，(+++)3／0；Ⅲ型(＋)—(++)15／6，(+++)0／9；Ⅳ型(＋)—(++)15／3，(+++)0／12。对照组Ⅰ型(＋)—(++)15／13，(+++)0／2，Ⅲ型(＋)—(++)14／14(+++)0／1，Ⅳ型(＋)—(++)14／11，(+++)0／4，(见表1)。结论：MEBO治疗深Ⅱ度烧伤创面修复愈合过程对疤痕具有影响，三种类型胶原中以Ⅰ变化不大，Ⅱ、Ⅳ型变化明显。与对照组比较这两种胶原变化是有差异的。本组病例较少不宜做统计学处理。但从中可以见到临床创面未形成增殖性疤痕与胶原的变化不无关系。
　　

〔关键词〕　MEBO　烧伤　深Ⅱ度　胶原　组化

一、目的：

1996年6月至1997年10月作者以烧伤湿润膏(MEBO)治疗深Ⅱ度烧伤创面，并用免疫组化方法研究创面修复过程胶原ⅠⅢⅣ型与烧伤创面愈合和疤痕的关系。

二、设计：

本研究随机以MEBO治疗烧伤深Ⅱ度创面11例，传统干性疗法6例。两组病例均于治疗前与创面愈合后1—15天内切取创面组织和皮肤送病理科腊块包埋。 全部病例标本取全后一次完成免疫组化染色。同时HE染色光镜证实为深Ⅱ度烧伤的病理改变。(见表1，表2)。

三、方法：

组化S－P染色方法的试剂抗胶原ⅠⅢⅣ型单克隆抗体均为美国SIGMA公司产品。S－P试剂盒美国ZYMED公司产品。以上均购自北京中山生物工程公司。染色操作过程①10%Formalin固定的组织石腊包埋连续切片4.0μm厚度。②切片脱腊无水。③3%H₂O₂卵育20min，PBS冲洗3min×3次。④加入10%正常羊备清。⑤加入1∶50Ⅲ型胶原和Ⅳ型胶原，1∶500Ⅰ型胶原单克隆抗体4℃下过夜。⑥PBS冲洗3min×3次。⑦滴加生物素标记的第二抗体1∶100稀释，37℃孵育10min。⑧PBS冲洗3min×3次。⑨辣根酶标记的链霉卵白素1∶100稀释37℃卵育10min。⑩PSB冲洗3min×3次。DAB显色，自来水冲洗复染封片。每批染色均设空白对照，用PBS缓冲液取代第一抗体。以正常皮肤组织作阳性对照。

四、结果：

依半定量法设定每张染色玻片在高倍镜和低倍镜下每视野所见着色阳性信号面积大小和色泽深浅计分为判定结果的指标。棕黄色面积＞75%得3分，＜25%得1分，两者之间得2分；色泽为深棕色得3分，浅棕黄色得1分，介于二者得2分。以上两组得分合计6分标为(+++)，4－5分标为(++)，2－3分标为(＋)。
　　MEBO治疗组，治疗前后胶原Ⅰ型为(＋)5／10例，(++)5／1例，(+++)1／10例。胶原Ⅲ型(＋)9／0例，(++)2／8例，(+++)0／3例。胶原Ⅳ型(＋)9／0例，(++)2／5例，(+++)0／6例。传统干性治疗组，治疗前后胶原Ⅰ型为(＋)4／1例，(++)1／3例，(+++)1／2例。胶原Ⅲ型(＋)1／0例，(++)5／2例，(+++)0／4例。胶原Ⅳ型(＋)%例，(++)6／2例，(+++)0／4例。(见表3)。

五、结论：

MEBO治疗组Ⅰ型胶原(++)－（+++）6／1例改变不大。Ⅲ型胶原(++)－(+++)2／11例改变较大。Ⅳ型胶原(++)－(+++)2／11例改变也较大。对照组胶原Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型(++)－(+++)的病例分别为2／5例，5／6例，和6／6例无明显差异。
　　总之，作者认为本研究的组化结果与临床所见基本一致。从国内外文献报道Ⅰ、Ⅲ型胶原均为细胞外基质的主要胶原。Ⅰ、Ⅲ型之间比例关系着创面修复愈合后的疤痕质量。Ⅲ型胶原占优势者修复创面趋向良好结局。Ⅳ型胶原主要见于基底膜，它对角朊细胞的分化、增殖有密切关系，而角朊细胞形成创面上皮化的主要角色。